使用液氮罐超低温保存的方法

发布时间:2023-09-04,浏览量:118


  微生物可以低温保存,低温保存法有广泛的微生物保存法。对于需要杂乱养分的微生物种,如果不能坚持其生命力(如植物病原性真菌)的其他储存方法,一般可以低温保存。

  这种方法是以较慢的冷冻速度(1℃/分钟)冷冻存在于小管或安瓿中的细胞,直到-150℃,然后将这些小管保存在-150℃。~-在196℃的液氮中。低温冷冻保护剂不同于冷冻干燥法中使用的冷冻剂。甘油(10%)是ATCC常见的一种、大多数细胞株由二甲亚(5%)和培养液制成的混合物保存。

  这些化学物质进入细胞可以防止内膜的冷冻损伤。在低温容器中保存细胞恢复时,需要小心操作。当管道被加热时,形成的霜会杀死细胞,正确操作可以防止这种麻烦。只有快速冻结样品,才能减少活力的丧失。方法是将密封的管道迅速放入37℃的水中,直到所有的冰都溶解,然后打开管口,将内容物移入培养液。低温保存的微生物需要保存在非常低温的环境中,所以需要液氮罐。在长期储存过程中,需要经常注意液氮的填充。

  与冻干法相比,这种储存方法需要更多的资金,包括劳动力和液氮等,以保持储存温度。金凤液氮罐

  1数据病毒低温保管所需数据包括:热收缩塑料管、液氮罐、防护手套及面罩、标记笔、气体喷灯、液氮保温瓶。

  2方法

  (1)剪一段两端各超过冷冻管长度2cm的热缩塑料管。金凤液氮罐

  (2)将含有清除病毒悬液(安排培养的上清培养液,或安排培养液中的细胞溶解物)的上清悬液冷却几分钟,用杀菌移液管将0.2ml冷却后的上清悬液分配到冷冻管中,并拧紧盖子。

  将病毒冷冻管放入热收缩塑料管中,刺入正确的标签。

  (4)用喷灯小心加热收缩塑料管,并将其包裹在冷冻管中。切记不要在过高的温度下加热收缩塑料管。

  再次小心加热收缩塑料管的两端,用大镊子将管端口夹紧至完全密封。

  (6)在配有液氮的保温瓶中快速冷冻密封的冷冻管(操作时需戴口罩和手套)。

  (7)将冷冻冷冻管放入液氮罐内的格子中,一起记录样品的具体存放方向、实验编号、存放日期等。

  (8)需求耗时,从液氮罐中快速取出所需样品,放入37℃水浴箱冷冻后,用解剖刀将热收缩塑料管用冷冻管的硅化垫圈切开。拧开冷冻管的盖子时,不需要去除热收缩塑料管。


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